ELISA实验中注意事项
1. 对于血清样本不要剧烈摇晃以免溶血，且不能添加任何防腐剂或抗凝剂。在吸取时注意不要吸取白色或淡黄色沉淀，制备好的血清需置于冰上待用。
2. 若待测样品不能及时检测，样品制备后请分装，冻存于-20℃或-80℃，并注意避免反复冻融。所有样品应清澈透明，检测前样品中如有悬浮物应通过离心去除。不能使用溶血、高血脂或污染的
样品检测，否则结果将不准确。
3. 对于血清或血浆样品，可以加入50μL样品分析缓冲液后加50μL样品；如稀释比例大，将样品与样品分析缓冲液等量加入，不足部分用标准品稀释液补充至100μL。请注意记录好样品的稀释倍数。
4. 请先查阅相关文献确定样品中待检测蛋白的大致浓度，如果该浓度大于或者小于检测限，请适当稀释或浓缩后再进行检测。
5. 如果是手洗板，注意洗涤液不要溢出孔外，以免污染相邻的孔，特别是每次洗板的前两遍，若高浓度的孔污染了低浓度的孔或空白孔，会造成背景值增高。
6. 特别注意：设计实验的时候要考虑实验孔的位置，保证甩掉洗涤液时，空白孔、低浓度孔或阴性对照组在上面或一侧或分开最好。同时注意甩掉洗液的动作翻转（从正上方旋转120-150度）要迅
速、干脆。甩板不要手腕左右摇摆、旋转来甩液体！甩出后以直线方式补2-3次甩出液体。
7. 拍干最好用干净的吸水纸、滤纸或无尘布，不要用卫生纸，因为细小粉尘或者碎屑容易吸附到孔底，导致洗板不干净，结果偏高或偏低，重复孔的数值也会相差很大
8. 复孔的吸光值通常在20%的差异范围内结果才有效，复孔平均值可作为测量值。
9. 每个标准品或样品的吸光度值应减去本底校正孔的吸光度值（如果没有做校正孔，则不需要减去）。
10. 实测数据会因试剂盒供应商、试剂供应商、实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，因此每次实验都要重做标准曲线，供应商给提供的标曲用作辅助参考（如图9）。
11. 若样品OD值高于标准曲线上限，应适当稀释后重新测定，计算浓度时需注意乘以样品的稀释倍数。
12. ELISA结果图有多种展现形式，不拘泥于一种，选择合适的风格即可。