1.原理
测定过氧化氢(H2O2)与钼酸铵生成的络合物在405nm处的光吸收值,以此可以反映样本中过氧化氢(H2O2)的浓度
2.测定意义
过氧化氢是一种活性氧化代谢的副产物,在许多氧化应急反应中过氧化氢都是一种关键的调节因子。过氧化氢可以激活NF-kappaB等因子,这些过氧化氢相关的信号途径和哮喘、炎症性关节炎、动脉硬化以及神经退行疾病等许多疾病相关。过氧化氢也和细胞凋亡、细胞增殖等密切相关。本试剂盒可以用于组织内过氧化氢水平的测定,也可以用于血清、血浆或其它生物体液中的过氧化氢浓度的测定。
3.测试所需仪器设备及自备试剂
可见光分光光度计,恒温水浴锅,离心机, 漩涡混匀器,精密移液器,试管,双蒸水。
4.适用范围
本试剂盒适合测定血(浆),组织匀浆以及培养液样本中过氧化氢(H2O2)的含量。
5.试剂及配置
试剂 | 100T |
试剂1 | 钼酸铵显色剂,100ml*2瓶 |
过氧化氢标准液(5mg/ml) | 1ml*1支 |
6.样本处理
(1)血清、血浆:建议直接加样。
(2)组织匀浆液的制备:准确称取组织重量,按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的生理盐水,冰水浴条件下,制备成10%的组织匀浆,2500转/分离心10分钟,取上清,再用生理盐水稀释成最佳取样浓度。取空试管,每管加入蛋白沉淀剂0.6ml,再加入0.1ml组织匀浆上清,旋涡混匀,静置10分钟后,3500-4000r/min离心8分钟,取上清进行乳酸测定。
(3)细胞培养上清:建议直接加样。
7.操作步骤
试剂(ml) | 空白管 | 标准管 | 测定管 |
蒸馏水 | 0.1 |
|
|
过氧化氢标准品 |
| 0.1 |
|
待测样品 |
|
| 0.1 |
试剂1 | 2 | 2 | 2 |
混合均匀,室温下放置15min,1cm光径,405cm处测定各管吸光值

(1)样本取样量要做预试,吸光度大于?0.8?以上则需将样本进行稀释。若吸光度小于?0.05?以下,则需?将取样量增加。
(5)为了您的健康和安全,请使用一次性手套。