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过氧化氢酶(CAT)测定试剂盒(钼酸铵法)

BPC029 Catalogue No.
100T
220.00
过氧化氢酶(CAT)
批间差:CV<10%
批内差:CV<8%

1.原理

过氧化氢酶(CAT)分解H2O2的反应可通过加入钼酸铵而迅速中止,剩余的H2O2与钼酸铵作用产生一种淡黄色的络合物,在405nm处测定其变化量,可计算出过氧化氢酶的活力。

2.测定意义

过氧化氢酶能迅速分解细胞代谢中产生的毒性物质过氧化氢,是一种体内的抗氧化酶。在临床检验上,过氧化氢酶的升高对某些疾病可能是有用的诊断工具。此外,检测该酶对抗衰老、肿瘤发病机制及自由基代谢失衡研究等也具有一定意义。

3.测试所需仪器设备及自备试剂

可见光分光光度计,恒温水浴锅,离心机, 漩涡混匀器,精密移液器。

4.试剂及配置

试剂

50T

100T


试剂1:

50ml*1瓶,直接使用

100ml*1瓶,直接使用


试剂2

粉剂*1瓶,试剂2用试剂3溶解,成为显色液,(如果底部有不溶粉末沉淀,直接取上清使用,不影响测定结果)

粉剂*1瓶,试剂2用试剂3溶解,成为显色液,(如果底部有不溶粉末沉淀,直接取上清使用,不影响测定结果)


试剂3

50ml*1瓶,用于溶解试剂2

100 ml *1瓶,用于溶解试剂2


试剂4

1.5ml*1瓶

3ml*1瓶



5.样本处理

(1)血清(浆):直接加样。

(2)组织匀浆液的制备:准确称取组织重量,按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的生理盐水,冰水浴条件下,制备成10%的组织匀浆,2500转/分离心10分钟,取上清,再用生理盐水稀释成最佳取样浓度。

6.操作步骤

试剂

空白管B1

空白管B2

测定管

试剂1(ml)

1

1

1

试剂1在37℃水浴5min

样本

0.2


0.2

显色液

1

1


试剂4


0.2


37℃准确水浴1min

显色液



1

混匀,10分钟后波长405nm,光径0.5cm,双蒸水调零,测定各管吸光度值

注:一般样本没有高脂等导致显著差异情况,对照管的样本更换成双蒸水,做1-2管对照即可。如需做样本自身对照,则试剂盒所测定样本数量减至48样。

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(1)测定血清和血浆时,如果样本不溶血,每批样本只需要随机挑2个样本做对照或者用双蒸水代替额样本做对照;如果样本溶血的话,必须每个样本都要做对照。

(2)测定组织匀浆时,如果样本不是高脂,每批样本只需要随机挑2个样本做对照或者用双蒸水代替额样本做对照;如果样本高脂,必须每个样本都要做对照。

(3)测定全血时,必需每个样本都要做对照。


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