髓过氧化物酶（MPO）测试盒（比色法）

1.原理

中性白细胞中存在有髓过氧化物酶 ，每个细胞中所含的酶的量是一定的，约占细胞干重的5%，该酶具有使过氧化氢还原的能力，利用这一特点可以分析酶的活力，并定量测定中性白细胞的数目。其原理如下：

   MPO+H2O2→复合物；复合物+AH2(供氢体) →H2O+MPO+A产物

通过供氢体邻联茴香胺供氢后生产黄色化合物，在460nm处通过比色测定A产物的生成量，从而推算出MPO的活力以及H2O2减少的量和白细胞的数目。

2.测定意义

髓过氧化物酶是中性粒细胞所特有，即使在有强吞噬作用的巨噬细胞中也极少或完全没有这种酶。在细胞化学上，一般将这种髓过氧化物酶作为中性粒细胞的标志。其功能为将氧化物和氧化氢转变为次氯酸盐。在炎症状态下，它被释入细胞外液，进入循环。此酶参与含LDL的脂类氧化。

3.测试所需仪器设备及自备试剂

可见光分光光度计,恒温水浴锅,离心机, 漩涡混匀器，精密移液器，试管。

4.适用范围

本试剂盒可测定动物血清、血浆、组织以及培养细胞、培养上清液、脑积液等样本中的MP0的活力。

5.试剂及配置

显色剂的配置：

a. 50T/25样:150ml试剂3应用液+试剂4一支+试剂5一支

b. 100T/50样:300ml试剂3应用液+试剂4两支+试剂5两支

6. 操作步骤

(1)血清（浆）样本：取血清（浆）与试剂二按1:1比例稀释，充分混匀。

混匀，在460nm处，1cm光径，双蒸水调零，测定各管OD值，记为A0，然后37℃孵育10分钟，再次测定各管吸光值A10

(2)组织样本：准确称取组织重量，按重量(g)：体积(ml)=1：9的比例加入9倍体积的试剂2，冰水浴条件下，制备成10%的组织匀浆，3000转/分离心15分钟，取上清加样。