乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒（微板法）

1.原理

乳酸脱氢酶在辅酶Ⅰ的递氢作用下，是乳酸脱氢而生成丙酮酸。

2.测定意义

乳酸脱氢酶（LDH）存在于人体各组织器官中.LDH是机体能量代谢中的一种重要酶，LDH质与量的改变，直接影响到机体的能量代谢, 当机体各组织器官病变时, 其组织器官本身的LDH要发生改变, 并且可引起血液中乳酸的改变.

乳酸脱氢酶(LDH) 是一种稳定的蛋白, 存在于正常细胞的胞质中, 一旦细胞膜受损,LDH即被释放到细胞外, 通过检测细胞培养上清中LDH的活性，可判断细胞受损程度，在一些应用中，比如药物筛选时，需要进行特定物质细胞毒性检测。`

3.测试所需仪器设备及自备试剂

可见光分光光度计,恒温水浴锅,离心机, 漩涡混匀器，精密移液器，试管。

4.适用范围

本试剂盒可测定动物血清、血浆、组织以及培养细胞、培养上清液、脑积液等样本中的LDH的活力。

5.试剂及配置

6.样本处理

（1）血清（浆）：建议5倍（1份血清：4份双蒸水）。

（2）组织匀浆液的制备：准确称取组织重量，按重量(g)：体积(ml)=1：9的比例加入9倍体积的生理盐水，冰水浴条件下，制备成10%的组织匀浆，2500转/分离心10分钟，取上清，再用生理盐水稀释成最佳取样浓度。

（3）细胞培养上清：建议直接加样。

7. 操作步骤

37℃孵育3分钟

混匀，37℃孵育15分钟

混匀，37℃孵育15分钟

混合后室温静置5分钟，440nm波长，双蒸水调零，测定吸光值。