总超氧化物歧化酶（SOD）测定试剂盒（WST-1法）
- 规格：50/100T
- 价格：420.00/720.00
1.原理
通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子自由基（O2•-）后者氧化羟胺形成亚硝酸盐，在显色剂的作用下呈现紫红色，用可见光分光光度计测其吸光度。当被测样品 中含SOD 时，则对超氧阴离子自由基有专一性的抑制作用，使形成的亚硝酸盐减少，比色 时测定管的吸光度值低于对照管的吸光度值，通过公式计算可求出被测样品中的SOD 活力。
2.测定意义
超氧化物歧化酶（SOD）对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用，此酶能清除 超氧阴离子自由基（O2•-）保护细胞免受损伤。因而SOD 活力的高低与衰老、肿瘤、炎症、 自身免疫病、血液病、心血管病、肾脏病、消化系统疾病、辐射、药物作用等有着密切的联 系，对疾病的病因学探讨、诊断、治疗、术后的观察有着重要意义。
3. 测试所需仪器设备及自备试剂
可见光分光光度计,恒温水浴锅,离心机, 漩涡混匀器，精密移液器，双蒸水，冰醋酸。
试剂 | 50T | 100T | |
试剂1： | 50ml*1瓶,直接使用 | 100ml*1瓶,直接使用 | |
试剂2 | 5ml*1瓶 | 10ml*1瓶 | |
试剂3 | 冻干粉*1瓶，测定时用双蒸水稀释到5ml | 冻干粉*1瓶，测定时用双蒸水定容到10ml | |
试剂4 | 贮存液350μl*1支，试剂4稀释液5ml*1瓶，使用时按贮存液：稀释液1:14比例稀释，用多少配多少，4℃保存。此试剂请在超净台操作。 | 贮存液350μl *2支，试剂4稀释液10ml*1瓶，使用时按贮存液：稀释液1:14比例稀释，用多少配多少，4℃保存。此试剂请在超净台操作。 | |
试剂5 | 粉剂*1瓶，用时加70℃～80℃热双蒸水37.5ml溶解后备用，若加热过程中水分蒸 发减少，此时必须用双蒸水补充至37.5ml，配好后的试剂避光4℃冷藏1年 | 粉剂*1瓶，用时加70℃～80℃热双蒸水75ml溶解后备用，若加热过程中水分蒸 发减少，此时必须用双蒸水补充至75ml，配好后的试剂避光4℃冷藏1年 | |
试剂6 | 粉剂*1瓶，用时加双蒸水37.5ml溶解后备用，配好后试剂避光4℃冷藏保存6个月 | 粉剂*1瓶，用时加双蒸水75ml溶解后备用，配好后试剂避光4℃冷藏保存6个月 |
*显色剂的配制：按试剂五:试剂六:冰乙酸=3:3:2的体积比配显色剂，用多少配多少，配
好的显色剂4℃避光冷藏3个月，试剂五、试剂六必须分开进行配制(切不可将试剂五、试剂六混合后再进行配制),否则不显色。
5. 操作步骤
试剂 | 测定管 | 对照管 |
试剂1（ml） | 1 | 1 |
样品 | a | |
双蒸水 | a | |
试剂2 | 0.1 | 0.1 |
试剂3 | 0.1 | 0.1 |
试剂4 | 0.1 | 0.1 |
用漩涡混匀器充分混匀，置37℃恒温水浴或气浴40分钟
显色剂 | 2 | 2 |
混匀，室温放置10min，550nm，1cm光径，双蒸水调零，比色
6. 最佳参考取样量
①红细胞抽提液一般为8.0～10μl
②大鼠红细胞抽提液为5μl左右
③人血浆（血清）一般为30～50μl
④小鼠血浆（血清）20μl左右
⑤1%组织匀浆30～50μl
⑥胞浆20～50μl
⑦心肌灌流液或肾透析液100～200μl
⑧白细胞悬液100～200μl
⑨细胞培养液100～200μl
