技术交流

BPRO品牌试剂盒操作简程(竞争法)

2005-01-18

实验准备

1.实验防护

2.实验相关设备和仪器准备

3.样品和试剂常温平衡30min

4.标准品按梯度稀释

5.洗涤液25倍稀释

6.生物素抗原稀释

7.亲和素HRP稀释

实验操作

操作顺序

空白孔

标准品孔

样品孔

零孔

1


各梯度标准品50ul

样品50ul

标准品稀释液50ul

2


生物素抗原50ul

生物素抗原50ul

生物素抗原50ul

3

轻轻摇晃,盖上封板膜,37℃培养箱中孵育30min

4

每孔加满洗涤液,静置30:秒后弃去,如此重复5次,拍干

5


加亲和素HRP50ul

加亲和素HRP50ul

加亲和素HRP50ul

6

轻轻摇晃,盖上封板膜,37℃培养箱中孵育30min

7

每孔加满洗涤液,静置30:秒后弃去,如此重复5次,拍干

8

显色剂A 50ul 再显色剂B   50ul

显色剂A 50ul 再显色剂B   50ul

显色剂A 50ul 再显色剂B   50ul

显色剂A 50ul 再显色剂B   50ul

9

轻轻震荡混匀, 37℃避光显色10分钟

10

加终止液50ul

加终止液50ul

加终止液50ul

加终止液50ul

11

10分钟内450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)

计算

根据浓度和OD值算出标准曲线的回归方程,再依据方程计算样本浓度。


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